Untersuchung des BMP-Signalweges mittels CaptiVate
CaptiVate Aufreinigungsverfahren zur Analyse des Signalwegs
CaptiVate™ Plattform: Beschreibung des Workflows
- Verwendung des Flp-In-Systems zur stabilen Expression
- Induzierbarer Promoter erlaubt regulierbare Expression
Teil I: Erstellung der stabilen Zelllinie
- Verwendung des Flp-In-Systems zur stabilen Expression
- Induzierbarer Promoter erlaubt regulierbare Expression
Teil II: Affinitätsreinigung des „Bait“-Komplexes
Teil III: LC-MS/M-Analyse, bioinformatische Auswertung
CaptiVate™ Plattform: Vorteile
- Physiologisch: Expression der “Bait” von einem integrierten Transgen erlaubt physiologische Expressionsmengen
- Reproduzierbar: alle Aufreinigungen werden im Triplikat durchgeführt (85% Reproduzierbarkeit)
- Sensitiv: es werden nur 3×106 Zellen pro Aufreinigung benötigt
- Spezifisch: bioinformatische Nachbearbeitung entfernt unspezifischen Hintergrund